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[质量检验] 请教下分子筛检测问题

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发表于 2023-12-20 13:50:28 | 显示全部楼层 |阅读模式

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目前产品是多肽  分子量大概是11.4KDa左右 目前选用的方法是25mmol/L磷酸盐+150mmol/L氯化钠缓冲液(pH7.4)    0.5流速柱温25℃  50min  正常检测图形都正常,目的蛋白在23-25min出峰,在最后原液一步车间将样品添加稳定剂(精氨酸、EDTA)后在目的蛋白后会贴近出现一个股峰,初步跑Buffer的时候就是EDTA、精氨酸的峰,无法进行分析了,我用的是东曹的G2000SWXL色谱柱  各位大神,需要改变什么条件可以将两者分离开或者有什么好方法使检测不收稳定剂干扰。急求帮助

有稳定剂

有稳定剂

正常峰形

正常峰形
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发表于 2023-12-20 16:54:16 | 显示全部楼层
精氨酸在280nm应该会有吸收峰。可不可以尝试换更合适的分子筛柱?将多肽和精氨酸分的更开。
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药徒
发表于 2023-12-20 17:01:04 | 显示全部楼层
要么试试改变盐浓度或者pH?虽然SEC理论上只和分子量有关,只能试试看?
看上去你们蛋白浓度好像比较低,如果蛋白浓度高,多稀释个几倍,EDTA的影响就小了。
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