消毒剂验证中载体定量杀菌计算

小星星qp2

想问一下大家，载体喷雾定量杀灭实验中，我的菌悬液是1×108~5×108cfu/mL浓度，取0.1mL制作 载体菌片后进行试验，采取按压接触碟采样方法培养，因为没有进行稀释等操作，那么在我计算菌落数的时候，要换算到多少倍数的菌数呢？

八档丶电风扇

没有稀释过的话那就是消毒前-消毒后=下降微生物浓度，比较好奇的是这么高的菌浓度，就算是消毒后，你用擦拭碟法不会长满无法计数吗？你消毒剂中和剂怎么中和消毒剂残留的？擦拭回收率能合格吗？

小星星qp2

八档丶电风扇 发表于 2024-5-17 15:50
没有稀释过的话那就是消毒前-消毒后=下降微生物浓度，比较好奇的是这么高的菌浓度，就算是消毒后，你用擦拭 ...

我是看到《消毒技术规范》里“载体喷雾定量杀菌试验”中也没提到阳性对照组需要稀释，所以很质疑。
2.1.1.7.6 载体喷雾定量杀菌试验操作程序
(1)根据所试菌种和消毒剂对该菌的杀灭能力，选定1个消毒剂浓度(即产品使用说明书中指定的最低浓度)和3个作用时间(说明书指定最短作用时间，指定最短作用时间的0.5倍，指定最低作用时间的1.5倍。如说明书指定最短作用时间为20min，则应进行10min、20min、30min 三个时间)进行试验。
(2)选定消毒剂的浓度与作用时间。每种菌所染菌片应分开进行试验。试验时，每种载体菌片各取 3 片，以等边三角形或三角形阵列，均匀排布于一未沾有任何消毒剂的清洁无菌玻璃板上(如无菌平皿内)。
(3)每批试验以同一浓度消毒剂溶液对上述排列的菌片进行均匀喷雾。每次喷雾的距离和压力保持一致，以尽量使喷到菌片上的雾粒大小和数量一致。喷雾量以不使菌片湿透、流液为度。
(4)待试验菌与消毒剂相互作用至各规定时间,取每种载体菌片1片,各放入一含 5.0ml中和剂的无菌试管中。将试管用电动混合器混合20s，或在手掌上振敲 80 次，使菌片上细菌被洗脱进入中和液中。
(5)吸取 1.0ml 上述洗液，按活菌培养计数方法测定存活菌数，每管接种 2 个平皿。(6)每批试验均应换一块未沾有任何消毒剂的清洁无菌玻璃板。喷雾器换装新浓度消毒
剂前，应将原残留消毒剂洗净，再换装新浓度消毒剂。
(7)用硬水代替消毒液，按同样的喷雾方法进行处理，作为阳性对照组。如为压力罐装自动喷雾式气雾消毒剂，可直接用染菌载体作活菌计数，作为处理前阳性对照。

八档丶电风扇

阳性对照组肯定是要稀释到小于100cfu才能计数的，至于作用时间、其实按照实际来就行了、像我们做的几种消毒剂反应时间就是30s-1min不等，法规上的方法可以参考、不用照搬

雨田12

用洗脱法好点吧。