苯酚硫酸法测多糖，最大吸收波长是480，请高手解惑。。。

zhjmxing · 发表于 2014-2-17 10:05:15

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文献上看到的都是490，我测的偏的那么厉害，是哪些原因造成的呢？

可亲可爱 · 发表于 2014-2-17 10:14:40

先把仪器校验一下,瞧瞧波长是不是准确.

zhjmxing · 发表于 2014-2-17 10:25:55

可亲可爱发表于 2014-2-17 10:14
先把仪器校验一下,瞧瞧波长是不是准确.

仪器是校验过的，用葡萄糖做对照品的最大吸收波长是490，但是多糖水解后的波长是480

幻影 · 发表于 2014-2-17 10:28:31

测测对照品

zhjmxing · 发表于 2014-2-17 10:36:57

幻影发表于 2014-2-17 10:28
测测对照品

葡萄糖做对照品，最大吸收波长是490nm

子棋 · 发表于 2014-2-17 10:50:18

苯酚硫酸法不稳定因素较多：多糖提取的纯度、反应的时间、比色皿的A\B面放置等都会影响实验。

Mandy27ye · 发表于 2014-2-17 10:53:30

一般正负2nm是可接受的，你这个差得有点远吧

hongwei2000 · 发表于 2014-2-17 11:09:47

这本身就是一个非专属性的方法
不同糖衍生化的产物也不同
尤其是单糖与多糖差别可能会比较大
只能说二者是相似的
所以你不用纠结你的样品是否的最大吸收是否偏离
只要你的仪器没有问题（当然验证波长不应该是用你的对照品，而是使用相应的波长校准溶液或玻片）
你的方法是批准的就可以了
因为这个方法本身测定的结果就是相对的

可亲可爱 · 发表于 2014-2-17 11:21:04

zhjmxing 发表于 2014-2-17 10:25
仪器是校验过的，用葡萄糖做对照品的最大吸收波长是490，但是多糖水解后的波长是480

仪器波长校验按药典要求好象不是用葡萄糖做的.请瞧瞧药典的附录按规定做.

zhjmxing · 发表于 2014-2-17 12:18:58

可亲可爱发表于 2014-2-17 11:21
仪器波长校验按药典要求好象不是用葡萄糖做的.请瞧瞧药典的附录按规定做.

我再看看，谢谢

zhjmxing · 发表于 2014-2-17 12:20:28

hongwei2000 发表于 2014-2-17 11:09
这本身就是一个非专属性的方法
不同糖衍生化的产物也不同
尤其是单糖与多糖差别可能会比较大

听你这么说，又了解了很多，谢谢

zhjmxing · 发表于 2014-2-17 12:21:06

Mandy27ye 发表于 2014-2-17 10:53
一般正负2nm是可接受的，你这个差得有点远吧

是啊，好远

zhjmxing · 发表于 2014-2-17 12:21:24

子棋发表于 2014-2-17 10:50
苯酚硫酸法不稳定因素较多：多糖提取的纯度、反应的时间、比色皿的A\B面放置等都会影响实验。

好的，谢谢

[其他] 苯酚硫酸法测多糖，最大吸收波长是480，请高手解惑。。。

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