内毒素检查中样品同一比例两种稀释量结果不同，原因是什么呢？

haishuang8279

在给样品A做内毒素干扰实验和内毒素检查实验时发现的问题。内毒素限度值为2EU/ml，鲎试剂为0.25EU/ml，则最大稀释倍数为8倍，以此来做样品A的干扰实验和检查实验。
内毒素检查实验的样品管2管均不凝，而干扰实验的样品管2管均是凝的，导致干扰实验无效。（其他各组管均正常，该阳的阳该阴的阴）样品稀释都是4倍稀释后2倍稀释，只是量不同，
为什么结果就不一样呢？请大家帮忙分析下原因，很愁啊。（用的1ml注射器稀释）

供试品的制备 （内毒素检查实验）

MVD=c（1.0 ml/ ml）×L（  2   EU/ml）/λ（0.25EU/ml）= 8    取样品 0.2   ml，加入BET水 0.6   ml，得供试品（2C）0.8 ml； 取供试品（2C）0.4 ml，加入BET水0.4 ml，得供试品（C）0.8 ml。

供试品的制备 （干扰实验）

MVD=c（1.0 ml/ ml）×L（   2  EU/ml）/λ（    0.25  EU/ml）=      8     取样品  1.0  ml，加入BET水  3.0  ml，得供试品（2C）  4.0   ml； 取供试品（2C）1.0 ml，加入BET水1.0 ml，得供试品（C）2.0 ml。

火舞精灵

估计是污染了  现在一般都是一次性无热源吸头  注射器估计不是一次性的 是重复使用的吧

haishuang8279

火舞精灵 发表于 2017-9-29 10:16
估计是污染了  现在一般都是一次性无热源吸头  注射器估计不是一次性的 是重复使用的吧

这个原因绝不可能。注射器每用一次都更换，都是一次性使用。

328650673

重复一次呢

yaya19900816

同意楼上，可以换人重新做，排除试验操作造成的异常，以及所使用的器具，最好用新的除热原小试管，会不会是热原灭活剂的残留，还有就是你们的干扰试验是否采用2个厂家的鲎试剂，采用3批进行干扰试验，如果重新做依旧不凝固，可能要重新做一下干扰试验了

meizi850818

yaya19900816 发表于 2017-9-29 15:50
同意楼上，可以换人重新做，排除试验操作造成的异常，以及所使用的器具，最好用新的除热原小试管，会不会是 ...

请问采用两家的鲎试剂的依据是来源哪里啊，谢谢

yaya19900816

meizi850818 发表于 2017-12-22 07:04
请问采用两家的鲎试剂的依据是来源哪里啊，谢谢

中国药品检验标准操作规范2010年版

lanzhujingling

你选取的浓度就是稀释8倍的浓度是吗？看不太懂你的实验安排？如果干扰实验都没过关怎么能做正式检查实验呢？再者，用注射器是不太规范的，因为目前市场上的注射器是允许一定的热原存在的。

lanzhujingling

导致干扰实验无效的不是两个不一致，而是你的供试品

紫色依草

你要不要查一下，你的注射器是不是无热原的，还有就是你的内毒素检查试验是测的2C还是C，标准品是在哪里的，感觉实验过程都不对

foshandy

稀释是没有问题的，对于你这个样品而言8倍应该是存在干扰，所以建议系施工更高倍数试试，16倍32倍等，