单抗或者重组蛋白里的聚体，会算进纯度里吗？

张寅 · 发表于 2022-8-2 09:38:05

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想请问下各位老师
单抗或者重组蛋白在做纯度检测时，聚体会算进去吗？
比如主峰98%，聚体2%。纯度结果是报98%，还是100%？
（假设聚体有同样的活性）

李冰12 · 发表于 2022-8-3 08:53:24

个人觉得纯度应该不能将聚体计算在内

大闯 · 发表于 2022-11-15 16:21:43

纯度一般都指的是单体含量

张寅 · 发表于 2022-11-21 15:26:56

大闯发表于 2022-11-15 16:21
纯度一般都指的是单体含量

谢谢！

暗影幽殇 · 发表于 2022-11-21 15:38:58

方法能测出聚体，是不是报聚体含量更好一些。

曦水蓝天 · 发表于 2023-3-28 15:49:07

想请教一下成品含量咱们一般都是用什么方法检测的？如果用自制参比品做对照外标法计算的时候参比品纯度是否要折算进去

张寅 · 发表于 2023-3-29 15:39:07

曦水蓝天发表于 2023-3-28 15:49
想请教一下成品含量咱们一般都是用什么方法检测的？如果用自制参比品做对照外标法计算的时候参比品纯度是否 ...

我们用的是SEC-HPLC，外标法检测的，计算的时候有按照参比品的纯度进行折算的。

曦水蓝天 · 发表于 2023-3-30 14:05:08

张寅发表于 2023-3-29 15:39
我们用的是SEC-HPLC，外标法检测的，计算的时候有按照参比品的纯度进行折算的。

另外还想请教一下分子排阻跟反相色谱测得的纯度有什么区别如果对照品需要带纯度折算应该带哪个纯度比较合理？我们这边是用反相测的含量。。。生物小白虚心求教

张寅 · 发表于 2023-3-30 16:29:28

分子排阻法和反相色谱测的杂质不同
分子排阻法我们测的杂质主要是聚体，因为他流动性大多是盐相，对蛋白的影响较小，一般都是蛋白的原始的天然的形态，分离原理是根据蛋白分子量来分离，分子量大的先出峰
反相色谱法我们测的杂质主要是氧化峰，反相色谱的流动相有有机相，可能会使蛋白变性，分离原理可以认为是亲水疏水的程度不同。
我们也是因为分子排阻法测的时候，蛋白基本是原始天然形态，所以用分子排阻法，至于反相是不是能测含量，我不太清楚，好像大部分抗体的纯度都不太测反相，别说测含量了。
至于带哪个纯度，我觉得您用哪个方法测含量，就用哪个方法的纯度去折算。用另一个方法的纯度不太合理啊，测得杂质都不一样。

SYBK-lxp · 发表于 2023-3-30 16:52:46

聚体不能算进去

张寅 · 发表于 2023-3-30 16:59:04

SYBK-lxp 发表于 2023-3-30 16:52
聚体不能算进去

明白！谢谢！

Kevin1234567833 · 发表于 2023-4-1 21:25:07

不应该算进去，正常需要的只是单体，纯化过程中聚体应该能被分离出去，如果最终产品中还有聚体，需要优化纯化工艺

花瑟 · 发表于 2024-1-26 14:25:30

不会加聚体的。

wozi · 发表于 2024-2-1 13:30:03

可以算进去，看你怎样订标准，我们之前有一个项目的降解很多，为了赶进度，拿批件，就把它算进去了，不过需要确认其与单体无差异哈

[质量检验] 单抗或者重组蛋白里的聚体，会算进纯度里吗？

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