微生物的100cfu

慧儿123

蒲公英的平台简直太棒了，每次在这里提问都有热心的蒲友细心耐心的替我解答，爱你们。最近我做一些微生物实验，我遇到一个困扰我很久的问题，就是药典说的不大于100cfu的菌悬液是如何获得呢？如果我不买定量菌株，如果我没有麦氏比浊度仪我就真的做不到100cfu吗？自己稀释了好几次，铺平板自己数，总是不太成功，一会多，一会少、300、1000多、4个、5个，无语。怎么那么难，就没有比较可行的方案吗？我就是买了定量菌株也只能用一次，下次制备菌悬液又不行了。谁能理解我的难。。。。。。这个是我的qq，2385960571有喜欢交流问题的，加一下我好友吧，相互学习。

大小王是王炸

请问贵公司是家族企业吗，如果不是的话。有实际需求为什么要难为自己呢

火舞精灵

其实很简单的，既然知道了菌液制备及稀释过程，把影响稀释级的各项因素都考虑一下，比如固定人员，固定培养时间，固定菌液制备的培养基用量等等，当所有因素趋于一致的时候，菌液稀释过程就变得稳定，然后微调就可以达到自己需要的数量级

火舞精灵

可以和一些有多年经验的老师多交流

门门

别听楼上的瞎说，他肯定没干过这个活儿。
题主你干这个有5年以上实操经验了吗？没有的话，做不到很正常。5年以内就能做到的 都是动手能力的绝世高手。

石头忘记了开花

大小王是王炸 发表于 2023-6-13 15:57
请问贵公司是家族企业吗，如果不是的话。有实际需求为什么要难为自己呢

哈哈哈哈哈哈           

yir1g

用TSB进行培养比较容易做出来，培养18~24h，震荡均匀，取1ml至9ml，这样10倍稀释，至10的负7次方（具体多少次，自己摸索），这样最后就能得到100cfu/ml的了，多试试就稳定出来了

yir1g

yir1g 发表于 2023-6-13 16:17
用TSB进行培养比较容易做出来，培养18~24h，震荡均匀，取1ml至9ml，这样10倍稀释，至10的负7次方（具体多少 ...

每个菌都要试

慧儿123

yir1g 发表于 2023-6-13 16:17
用TSB进行培养比较容易做出来，培养18~24h，震荡均匀，取1ml至9ml，这样10倍稀释，至10的负7次方（具体多少 ...

谢谢，我是0.5到4.5，我再试试你说的这个稀释方法，^_^

慧儿123

Liyuanming0507 发表于 2023-6-13 16:15
哈哈哈哈哈哈

不是，我就是很纳闷，这个到底能不能做出来，关键我可能新接触微生物，担心自己做错，浪费材料。全买现成的，不够我实验的，我也是有点难呀，全是泪。

琦瑞福生

慧儿123 发表于 2023-6-13 16:32
不是，我就是很纳闷，这个到底能不能做出来，关键我可能新接触微生物，担心自己做错，浪费材料。全买现成 ...

怕啥，自己配置培养基那就，简简单单吧，TSB比较稳定

七-月

火眼金睛不是一天两天可以练成的，

yir1g

慧儿123 发表于 2023-6-13 16:29
谢谢，我是0.5到4.5，我再试试你说的这个稀释方法，^_^

都差不多吧 主要是最初的增菌要用TSB 不要用平板，比较好把握量

东皇太心

多摸索摸索就知道了。没人带你也是挺可怜的，哎。

赵小鱼

我们是直接买定量菌株用啊，一周集中一天一起做无菌，也不是特别贵吧

慧儿123

东皇太心 发表于 2023-6-16 08:56
多摸索摸索就知道了。没人带你也是挺可怜的，哎。

可不，整得我也是特别头疼，自己再试试吧

慧儿123

赵小鱼 发表于 2023-6-16 09:07
我们是直接买定量菌株用啊，一周集中一天一起做无菌，也不是特别贵吧

比较熟练还好，对我我这种新人来说，不是落这就是丢那，手忙脚乱，真是挑战

青』

本来就很难，这个还有一个笨办法就是大概稀释好了，比如-5，-6，-7稀释剂，都TSA计数一下培养到第二天，然后大概直到100在哪个地方，很难的，每次使用前一天稀释第二天用。要么就是稀释好一次得到比较好的浓度，然后分装，低温加甘油冷冻-80℃保存起来用一两个月，到时候快速解冻用，就类似自己制备自己用的定量菌株，不过好像需要实验验证支持效期吧？

赵小鱼

慧儿123 发表于 2023-6-16 16:12
比较熟练还好，对我我这种新人来说，不是落这就是丢那，手忙脚乱，真是挑战

都是由生到熟练的，这个多做几次熟练了就好了

慧儿123

火舞精灵 发表于 2023-6-13 16:10
其实很简单的，既然知道了菌液制备及稀释过程，把影响稀释级的各项因素都考虑一下，比如固定人员，固定培养 ...

谢谢您的经验分享，听你一说，看来我做的还是少，再多做几次