为什么G25层析系统收样时，pH是先降后升，而且最低点还低于PB溶液的pH值呢？

挺～

使用G25层析系统，介质是葡聚糖，紫外示数检测光谱大于400nm时开始收样，下降时准备下降至400nm以下时结束收样。层析系统使用6.0左右的PB缓冲液冲至平衡，然后使用7.3左右的蛋白原液进行上样。这个过程中对刚开始大于400nm时取样，对达到峰值拐1时取样，对峰值中间时取样，对峰值达到拐2取样，对准备下降至400nm以下时取样，对下降至基线时取样。我们发现，刚刚大于400nm时pH在6.1以下，示数达到拐1时pH5.95左右，示数达到中间时pH5.97左右，当示数达到拐点2时pH在6.7左右，示数在准备下降至400nm以下时pH在7.0左右，示数下降至基线时pH达到了7.5。

为什么pH是先降后升，而且最低点还低于PB溶液的pH值呢？

挺～

我想了一下会不会是pH变大说明H+离子从蛋白液中被“拿走”，H+被’拿走‘’，那说明杂质走了葡聚糖的网状结构的空隙与目的蛋白质分离。这样对不对？？？

yuansoul

上个图吧。。。。。说的。。。。。。。有点 。。。。。逻辑不清晰

Lily_VIP

外行人果真根本看不懂

挺～

不好意思，本来是上传图片的，没成功，现在上传

yuansoul

缓冲  仅仅是 一种 理念
ph  远不是 高中 简单 原子得失电子 理论能够完美阐述
ph 具体数据 ，你怎么获得？

简单说。你这是 一次数据趋势，还是多次数据 都是这个规律？

挺～

yuansoul 发表于 2024-12-27 07:09
缓冲  仅仅是 一种 理念
ph  远不是 高中 简单 原子得失电子 理论能够完美阐述
ph 具体数据 ，你怎么获得 ...

我们拿生产过程中多余的原液进行了2次的验证，pH都升高了

yuansoul

挺～ 发表于 2024-12-27 08:34
我们拿生产过程中多余的原液进行了2次的验证，pH都升高了

可重复就行


你纠结啥？ 从 简单化学层面 违背 理论值？

故里jxz

我倒觉得不用纠结，料液中组成成分比较复杂，G25又是分子筛层析，分子量不同的组分出峰有先后，背后隐藏的pH变化比较复杂。如果是生产阶段的话没有必要去研究透具体哪一段是哪一个组分，这是研发阶段需要研究的事情。