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蛋白表达的问题

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药徒
发表于 2013-4-1 20:42:40 | 显示全部楼层 |阅读模式

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1.基因工程的目的蛋白表达应该和菌种与发酵是相关的,但如何能够提高目的蛋白的表达,减少杂蛋白的量?
2.为何会出现LB培养诱导的表达杂带少,而发酵阶段杂带多的问题,只是因为发酵的培养基成分丰富吗?
3.在基因工程制药中,发酵阶段的优化对于提高目的蛋白的纯度有绝对作用吗?

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药生
发表于 2013-4-1 21:05:41 | 显示全部楼层
这三个问题……
1提高表达量这种事可以讲一个学期的课。总之可以尝试不同的培养基,可以加压力,比如加入类似于MSX,MTX之类的东西吧……还有一个就是相同单位表达量的时候,细胞密度大,总量也大,可以加入一定的碱液中和乳酸,加入泡敌消泡,提到细胞产量。
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药生
发表于 2013-4-1 21:06:27 | 显示全部楼层
看是什么杂带,有的是蛋白后期形成二聚体和多聚体,东西多了,它们自身是好朋友,会自己聚集的,那么杂带也就多了
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药生
发表于 2013-4-1 21:07:25 | 显示全部楼层
转染是绝对作用……也就是说,一开始的细胞构建或者种子构建,构建后的种子的质量要好,先天是很重要的……
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药徒
 楼主| 发表于 2013-4-1 21:09:49 | 显示全部楼层
十分感谢楼主!{:soso_e183:}
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药生
发表于 2013-4-2 08:38:34 | 显示全部楼层
不客气,多来这里逛逛
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药徒
 楼主| 发表于 2013-4-2 12:34:58 | 显示全部楼层
好的,一定!也希望版主和各位蒲友多多指教!
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