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[检验及监测] 如何计算每1ml含50-100cfu的菌悬液?

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发表于 2015-1-27 15:37:09 | 显示全部楼层 |阅读模式

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最近在学习细菌和霉菌酵母菌的计数方法的验证,说要用0.9% 无菌氯化钠制成50-100cfu的菌悬液,怎么才能计算50-100cfu/ml?是要用铺平皿的方法吗?谢谢!!
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药徒
发表于 2015-1-27 15:41:46 | 显示全部楼层
是的,同时平皿计数,一般还做两个平均,以确认真实的菌落数,你可以看看论坛里有的验证方案,或者查一些文献就看出来了。
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 楼主| 发表于 2015-1-27 15:45:36 | 显示全部楼层
好时光 发表于 2015-1-27 15:41
是的,同时平皿计数,一般还做两个平均,以确认真实的菌落数,你可以看看论坛里有的验证方案,或者查一些文 ...

比如用金黄色葡萄球菌10的-6次方为例,两个平皿分别是(160、156)平均值就是158.然后怎么计算呢?

点评

不一定非得在这个之间,稍微差别一点没关系,操作起来肯定是这样的。如果不能确定,就先预试验下,白金耳处理与后续释稀的时候注意一点即可以了。通常都在10-6 与10-7比较多。  详情 回复 发表于 2015-1-27 16:02
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药徒
发表于 2015-1-27 16:02:36 | 显示全部楼层
nasjna 发表于 2015-1-27 15:45
比如用金黄色葡萄球菌10的-6次方为例,两个平皿分别是(160、156)平均值就是158.然后怎么计算呢?

不一定非得在这个之间,稍微差别一点没关系,操作起来肯定是这样的。如果不能确定,就先预试验下,白金耳处理与后续释稀的时候注意一点即可以了。通常都在10-6 与10-7比较多。
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药徒
发表于 2015-1-27 16:18:17 | 显示全部楼层
一般一个平皿10~50个CFU好计数,太多不好计数,太少代表性差。接种量一般1.0mL,稀释倍数可灵活确定。测定好CFU后,稀释至75CFU就可以了。
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 楼主| 发表于 2015-1-27 18:03:16 | 显示全部楼层
leehwadong 发表于 2015-1-27 16:18
一般一个平皿10~50个CFU好计数,太多不好计数,太少代表性差。接种量一般1.0mL,稀释倍数可灵活确定。测定 ...

您好,这个75是怎么得出来的呢?
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药徒
发表于 2015-1-27 18:26:35 | 显示全部楼层
nasjna 发表于 2015-1-27 18:03
您好,这个75是怎么得出来的呢?

取范围的中间值。
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药徒
发表于 2015-1-27 18:28:43 | 显示全部楼层
50-100cfu是实验做出来的,不是得出来,你稀释至10-6,10-7,10-8次方是你自己做出来的,每个人做可能需要的稀释倍数是不一样的,一般是在-6、-7居多。你不确定的情况下,第一次做就是-6,-7,-8一起做,看那个稀释级适合你数得出50到100菌落。
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药徒
发表于 2015-1-27 21:20:58 | 显示全部楼层
不是计算出来的,而是通过实验得出来的。就比如像含量检测一样,检所配溶液的浓度。
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 楼主| 发表于 2015-1-28 11:54:17 | 显示全部楼层
谢谢上面的各位老师,现在能明白一些了!
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药徒
发表于 2015-1-30 23:24:59 | 显示全部楼层
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药徒
发表于 2015-2-2 23:29:43 | 显示全部楼层
抛弃1ml菌液的操作方式
使用0.1ml你会发现另外一片天
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发表于 2016-4-21 07:27:10 | 显示全部楼层
不拘小杰 发表于 2015-2-2 23:29
抛弃1ml菌液的操作方式
使用0.1ml你会发现另外一片天

你好,请问,这个0.1ml是怎么回事?新手,能给具体解释一下吗?谢谢了。
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发表于 2016-4-21 07:34:27 | 显示全部楼层
不拘小杰 发表于 2015-2-2 23:29
抛弃1ml菌液的操作方式
使用0.1ml你会发现另外一片天

你好,请问,这个0.1ml是怎么回事?新手,能给具体解释一下吗?谢谢了。
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发表于 2016-4-21 07:34:58 | 显示全部楼层
不拘小杰 发表于 2015-2-2 23:29
抛弃1ml菌液的操作方式
使用0.1ml你会发现另外一片天

你好,请问,这个0.1ml是怎么回事,新手,能给具体解释一下吗,谢谢了
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