方法验证中关于线性的讨论

月与天空

最近收到一个国外客户的发补意见，要求我们线性要配制5个线性浓度溶液，每个浓度配制3个平行样，共配制15份样品，然后分别进样1针，需要计算残差，绘制残差图，另外还需计算方差。我查阅了ICH、EP、USP，貌似均没有明确说明要每个浓度配3份，只提到统计学计算，报告相关系数，y-截距，线性回归的斜率和剩余平方和。只有中国GMP指南中有明确说同一个浓度进样3针，总共也是15针，举的例子中有说需要计算剩余标准差。请问各位是怎么做的呢？是否有计算模板可以共享，万分感谢。

gdg661837

查阅中国药典，并没有发现你所说的15个样品。
没这个必要，为什么要一个浓度配三份？意义何在？
怕配错？看峰面积不就知道了？
而且方法学验证中，本身就有重复性和系统适应性。

飞凌大圣

中国的指南会把人带到沟里的，谨慎参考！

月与天空

gdg661837 发表于 2019-3-25 16:29
查阅中国药典，并没有发现你所说的15个样品。
没这个必要，为什么要一个浓度配三份？意义何在？
怕配错？ ...

您好，我说的是中国GMP指南，中国药典、ICH和USP里确实没说，我们目前已经被两家巴西客户提到了这项缺陷

月与天空

这个是巴西法规原文：
Art. 23 A linearidade de um método deve ser demonstrada por meio da sua capacidade de obter respostas analíticas diretamente proporcionais à concentração de um analito em uma amostra.
Art. 24 Uma relação linear deve ser avaliada em toda a faixa estabelecida para o método.
Art. 25 Para o estabelecimento da linearidade, deve-se utilizar, no mínimo, 5 (cinco) concentrações diferentes da SQR para as soluções preparadas em, no mínimo, triplicata.
Parágrafo único. As soluções utilizadas para avaliação da linearidade devem ser preparadas de maneira independente, podendo ser utilizadas soluções diluídas de uma mesma solução mãe da SQR.
Art. 26 Todos os cálculos para a avaliação da linearidade devem ser realizados a partir dos dados de concentrações reais e respostas analíticas individuais.
Art. 27 Para avaliação da linearidade, devem ser apresentados os seguintes dados:
I.- representação gráfica das respostas em função da concentração do analito;
II.- gráfico de dispersão dos resíduos, acompanhado de sua avaliação estatística;
III.- equação da reta de regressão de y em x, estimada pelo método dos mínimos quadrados;

gdg661837

那没办法咯，你就按照巴西佬的做呗。

月与天空

还有没有哪位专业人士给出宝贵意见的？

米米果果

在GB-T32465-2015 化学分析方法验证确认和内部质量控制要求中线性章节中7.6.3 中指出"标准曲线每个浓度点要求至少重复侧din2次,建议3次或更多,"

tiantiancw

中国GMP指南，是说至少制备5个浓度的供试样品，每个浓度各一份，每份测定3次，也没有说共制备15份样品啊

liu2612

如果从客户审计的角度来说，你就按照他们的要求补做、重做即可，以后对于这家客户就按照此策略执行吧；不过国内的法规要求确实没有如此，这就这几道是不是要更改自己的管理规程了。

月与天空

米米果果 发表于 2019-5-13 17:42
在GB-T32465-2015 化学分析方法验证确认和内部质量控制要求中线性章节中7.6.3 中指出"标准曲线每个浓度点要 ...

感谢分享，现在方法验证也是仁者见仁，智者见智

月与天空

tiantiancw 发表于 2019-5-15 08:28
中国GMP指南，是说至少制备5个浓度的供试样品，每个浓度各一份，每份测定3次，也没有说共制备15份样品啊

是的，所以最终我们也是液体进样的同一针进3针，顶空的配制15瓶，他们也没提什么意见

月与天空

liu2612 发表于 2019-5-15 08:36
如果从客户审计的角度来说，你就按照他们的要求补做、重做即可，以后对于这家客户就按照此策略执行吧；不过 ...

现在各国标准都有所差异，要兼顾各国还是比较麻烦，特别是一个产品买几个国家的